Columna de cromatografía de permeación de gel
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Columna de cromatografía de permeación de gel

1. columna cromatográfica de vidrio
2. columna cromatográfica (tipo de rotación)
3. columna cromatográfica (manual)
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Descripción

Parámetros técnicos

Columna de cromatografía de permeación de gel(Columna GPC para abreviar) es el componente central de la tecnología de cromatografía de permeación de gel (GPC para corta). GPC, como una técnica eficiente de cromatografía líquida, fue desarrollado por J. en 1964 C. Desde el éxito de la investigación de Moore, ha jugado un papel importante en varios campos de la ciencia de los polímeros. Fue en 1964, por J C. Moore fue el primero en realizar una investigación con éxito. No solo se puede utilizar para la separación e identificación de sustancias de moléculas pequeñas, sino que también se puede usar para analizar homólogos de polímeros con las mismas propiedades químicas, sino diferentes volúmenes moleculares (los polímeros se separan en una columna de separación de acuerdo con su volumen de dinámica de fluidos moleculares tamaño).

Gel Permeation Chromatography Column | Shaanxi Achieve chem-tech Gel Permeation Chromatography Column | Shaanxi Achieve chem-tech Gel Permeation Chromatography Column | Shaanxi Achieve chem-tech Gel Permeation Chromatography Column | Shaanxi Achieve chem-tech

(1) Todos los componentes se eluyen antes de la elución de la molécula solvente, con un corto tiempo de separación.

(2) Puede predecir el tiempo de elución y permitir la inyección continua.

(3) El proceso de separación de la cromatografía en gel no depende de las fuerzas intermoleculares.

(4) Tiempo de retención corto, pico cromatográfico estrecho, fácil de detectar.

En general, no se acumulan moléculas fuertemente retenidas en la columna cromatográfica, por lo que los componentes de la muestra no se perderán durante la separación, y la vida útil de la columna también se extenderá.

 

Parámetro

Column chromatography parameter | Shaanxi achieve chem

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Principios básicos

Principio de separación

Gel es químicamente inerte,columna de cromatografía de permeación de gelno tiene adsorción, distribución e intercambio de iones. Deje que la solución de polímero medida pase a través de una columna cromatográfica con diferentes tamaños de poro, donde las vías disponibles para que las moléculas pasen a través de la columna incluyen espacios entre partículas (más grandes) y a través de agujeros dentro de partículas (más pequeñas). Cuando la solución de polímero fluye a través de la columna cromatográfica (partículas de gel), las moléculas más grandes (más grandes que los poros en gel en volumen) se excluyen de los poros de las partículas, y solo pueden pasar a través de los espacios entre partículas a una velocidad más rápida; Las moléculas más pequeñas pueden ingresar a los poros pequeños en partículas a una velocidad mucho más lenta; Las moléculas de volumen medio pueden penetrar poros más grandes, pero se ven obstaculizados por poros más pequeños, cayendo entre las dos situaciones mencionadas anteriormente. [1] Después de pasar por una cierta longitud de la columna cromatográfica, las moléculas se separan en función de su peso molecular relativo, con aquellos con mayor peso molecular relativo en el frente (es decir, un tiempo de elución más corto) y aquellos con menor peso molecular relativo en la parte posterior (( es decir, tiempo de elución más largo). El volumen total de lixiviado recibido de la muestra que ingresa a la columna hasta la lixiviación se llama el volumen lixiviado de la muestra. Después de determinar el instrumento y las condiciones experimentales, el volumen de elución del soluto está relacionado con su peso molecular, y cuanto mayor es el peso molecular, menor es el volumen de elución.
(1) Exclusión de volumen
(2) difusión restringida
(3) Separación de flujo

Principio de corrección

Una curva de calibración se crea de antemano utilizando un polímero estándar monodisperso con peso molecular relativo conocido, que corresponde al volumen de elución o tiempo de elución y un peso molecular relativo. Casi no se pueden encontrar muestras estándar monodispersas en los polímeros, y generalmente se usan muestras de distribución estrecha. En las mismas condiciones de prueba, se crearon una serie de espectros estándar GPC, correspondientes a los tiempos de retención de muestras con diferentes pesos moleculares relativos. La curva obtenida trazando LGM contra T se llama "Curva de calibración". Al corregir la curva, se pueden calcular varios pesos moleculares relativos requeridos y distribuciones relativas de peso molecular a partir del espectro GPC. No hay muchos tipos de polímeros que puedan producir muestras estándar en polímeros. Sin muestras estándar, es imposible tener curvas de calibración para polímeros, y también es imposible obtener el peso molecular relativo y la distribución relativa del peso molecular de los polímeros utilizando métodos GPC. Para esto, se puede usar el principio de corrección universal.

Principio de calibración universal

Debido al hecho de que GPC separa los polímeros basados ​​en el volumen de dinámica de fluidos moleculares, lo que significa que para el mismo volumen de dinámica de fluido molecular, fluye en el mismo tiempo de retención, lo que resulta en el mismo volumen de dinámica de fluido.
El volumen de la dinámica de fluidos de dos tipos de cadenas flexibles es el mismo:

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Si se conocen los valores K y alfa de la muestra estándar y el polímero medido, la masa molecular relativa de la muestra puede calibrarse usando una muestra estándar con masa molecular relativa conocida

 

Sección experimental

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Método directo:

Midiendo simultáneamente la viscosidad o la dispersión de la luz de la concentración de lixiviado para determinar su peso molecular.

Método indirecto:

Usando un conjunto de muestras monodispersas con pesos moleculares variables como muestras estándar, su volumen de elución y peso molecular se pueden medir por separado para determinar la relación entre los dos.

 

instrumento

Columna de cromatografía de permeación de gelEl instrumento consiste en un sistema de bombeo, sistema de muestreo (automático), columna cromatográfica de gel, sistema de detección y sistema de adquisición y procesamiento de datos.

 

1.1. Sistema de bomba:incluyendo un tanque de almacenamiento de solvente, un conjunto de dispositivos de desgasificación y una bomba de alta presión. Su trabajo es hacer que la fase móvil (solvente) fluya hacia la columna cromatográfica a una velocidad de flujo constante. La condición de trabajo de la bomba afecta directamente la precisión de los datos finales. Cuanto más preciso sea el instrumento, más estable se requiere el estado de trabajo de la bomba. El error de caudal requerido debe ser menor que 0. 01ml/min.

 

1.2. Columna:El componente central para separar los instrumentos GPC. Es para agregar partículas con diferentes tamaños de poros como rellenos en un tubo de acero inoxidable hueco. Cada columna cromatográfica tiene un cierto rango de límite de separación y permeación de peso molecular relativo, y hay límites superiores e inferiores para el uso de columnas cromatográficas. El límite superior para el uso de la columna cromatográfica es que cuando el tamaño de la molécula más pequeña del polímero es mayor que el tamaño del gel más grande en la columna cromatográfica, el polímero no puede ingresar el tamaño de poro de las partículas de gel, y todo de Fluye a través del exterior de las partículas de gel, lo que no logra el propósito de separar polímeros con diferentes pesos moleculares relativos. Además, es posible bloquear el poro de gel, lo que afectará el efecto de separación de la columna cromatográfica y reducirá su vida útil. El límite inferior para el uso de columnas cromatográficas es que cuando el tamaño máximo de la cadena molecular en el polímero es menor que el tamaño mínimo de poro del poro de gel, no se logra el propósito de separar diferentes pesos moleculares relativos. Por lo tanto, cuando se usa el cromatógrafo de gel para determinar el peso molecular relativo, es necesario seleccionar primero la columna cromatográfica que coincida con el rango de peso molecular relativo de polímero.

 

1.3. Relleno (el relleno se seleccionará de acuerdo con el solvente utilizado, y el requisito básico para el relleno es que el relleno no se puede disolver por solvente):gel de poliestireno reticulado (aplicable al disolvente orgánico, gel de acetato de polivinilo reticulado) resistente a la temperatura a alta temperatura) (hasta 100 grados, aplicables a solventes polares como etanol y propanona) bola de silicio poroso (aplicable al agua y solvente orgánico), vidrio poroso, óxido de aluminio poroso (aplicable al agua y solvente orgánico)

 

1.4. Columna:Vidrio, acero inoxidable

 

1.5. Sistema de detección:Detector universal: adecuado para la detección de todos los polímeros y compuestos orgánicos. Hay detectores de refractómetros diferenciales, detectores de absorción ultravioleta y detectores de viscosidad.

 

1.6. Detector de refractómetro diferencial:El índice de refracción del solvente debe ser lo más diferente posible del de la muestra que se mide.

 

1.7. Detector de absorción UV:El disolvente no tiene una fuerte absorción cerca de la longitud de onda de absorción característica del soluto.

 

1.8. Detector selectivo:Adecuado para polímeros altos y compuestos orgánicos que tienen una respuesta especial al detector. Hay detectores UV, IR, fluorescencia, conductividad, etc.

operación

 

2.1. Selección de solventes:capaz de disolver varios polímeros; No se puede corroer componentes del instrumento; Coincidir con el detector.

 

2.2. Combinación de dispersión de luz láser con cromatógrafo de gel:Podemos obtener no solo el espectro de concentración, sino también el espectro de la intensidad de la luz de dispersión versus el volumen de lixiviación, para calcular la curva de distribución de peso molecular y varios pesos moleculares promedio de toda la muestra.

 

2.3. En Experimentos de dispersión de luz láser: columna de cromatografía de permeación de geles necesario eliminar estrictamente el polvo de la muestra. El polvo en la solución puede causar una fuerte dispersión de la luz, interfiriendo seriamente con la medición de la dispersión de la luz en las soluciones de polímeros. La eliminación de polvo de la solución es la clave para el éxito o la falla de la dispersión de la luz. En primer lugar, se requiere eliminación de polvo del solvente. El disolvente utilizado para preparar la muestra de prueba debe destilarse y filtrarse a través de una membrana ultrafiltración de 2 μ m de membrana antes de usar. La solución preparada también debe filtrarse a través de una membrana de ultrafiltración de 0.2 μ m. Además, los instrumentos utilizados en la prueba, como las jeringas, deben empaparse en detergente y enjuagarse vigorosamente con agua antes de su uso.

 

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